生化培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法的應用

一、兩種方法的基本原理

1、生化培養(yǎng)箱的多管發(fā)酵法

 生化培養(yǎng)箱初發(fā)酵的實驗：生化培養(yǎng)箱的發(fā)酵管內裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，并在內倒置有小的玻璃管。每個樣品都使用三個不同的水樣量接種，相同的接種水樣量要有五管，將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中，在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。

 乳糖能起到選擇的作用，因為許多**都不能發(fā)酵乳糖，而大腸菌群能夠發(fā)酵乳糖并且產酸產氣。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑，**產酸后，培養(yǎng)液即由原來的紫色變成黃色。產酸產氣的發(fā)酵管表明試驗陽性，如在倒管內產氣不明顯，可輕拍發(fā)酵管，有小氣泡升起為陽性。

 生化培養(yǎng)箱復發(fā)酵的實驗  輕微振蕩初發(fā)酵試驗陽性結果的發(fā)酵管，用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物（2-3環(huán)）轉接到EC培養(yǎng)液中，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h（提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來自自然環(huán)境的大腸菌群的生長）。培養(yǎng)后立即觀察，發(fā)酵管產氣則證實為糞大腸菌群陽性。

2、生化培養(yǎng)箱的濾膜法

 濾膜是一種微孔性濾膜，孔徑0.45μm。將水樣注入已**的放有濾膜的過濾器中，經過抽濾，**即被截留在膜上，然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍色或藍綠色，其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無色。正常情況下，由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用，在M-FC培養(yǎng)基上很少見到非糞大腸菌菌落。

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